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高速离心机分析性离心原理介绍
发布时间:2012-10-23   点击次数:2861次
  高速离心机分析性超速离心不同于制备性超速离心,分析性超速离心主要是为了研究生物大分子的沉降特征和结构,而不是实际的收集一些特殊的部分。因此,它使用了特殊设计的转子和检测系统,以便连续地监视物质在一个离心场中的沉降过程。分析性超速离心在生物学方面的应用,包括测定生物大分子的分子量、估价样品的纯度和检测大分子构型的变化。
  
  高速离心机分析性离心可以在约70000转/分的速度进行操作,产生高达500000g的离心场。高速离心机分析性离心主要由一个椭圆形的转子组成,这转子通过一个有柔性的轴联接到一个高速的驱动装置上,这种轴可使转子在旋转时形成它自己的轴。转子在一个冷冻的和真空的腔中旋转。转子能容纳两个小室:一个分析室和一个配衡室。这些小室在转子中始终保持着垂直的位置。配衡室是一个经过精密加工的金属块,作分析室的平衡用。在配衡室上钻通二个孔(它们离开旋转中心的距离是经过标定的)。这些定标是用来确定分析室中的距离。分析室(通常的容量是1毫升)是扇形的,当它正确地排列在转子中时,尽管处于垂直的位置,但是它的原理却和一个水平式转子相同,产生了一个十分理想的沉降条件。分析室有上下二个平面的石英窗(如图1)。
  
  超高速离心机中装有一个光学系统,在整个离心期间都能观察小室中沉降着的物质。在预定的时间可以拍摄沉降物质的照片。可以通过紫外光的吸收(如对蛋白质和DNA)或者折射率上的不同(如Schlieren系统或Rayteigh干涉量度法)对沉降物进行监视。后面这些方法是利用了这样一个现象,即当光线通过一个具有不同密度区的透明液体时,在这些区带的界面上使光发生了折射。在分析室中物质沉降的情况下,在重颗粒和轻颗粒之间形成的界面就像一个折射的透镜,结果在检测系统的照相底板上产生了一个“峰”。由于沉降不断进行,界面向前推进,因此峰也移动了。从峰移动的速度可以得到物质沉降速度的一个指标。

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