中性粒细胞来源于骨髓,与细胞的吞噬和消化功能有关。中性粒细胞分离是实验室常规性实验,以下是具体操作内容。
试剂与耗材:人淋巴细胞分离液、RP1640、15ml离心管4支,蜀科低速离心机,棉球,止血带、碘伏、采血针,5mlEDTA抗凝采血管2支。1ml 枪及枪头。
分离步骤:
1. 所有试剂恢复室温;
2. EDTA抗凝采血管收集人外周血10ml;
3. 分别将5ml外周血加入5ml人淋巴细胞分离液中(15ml离心管中进行);注意动作轻柔缓缓加入;
4. 蜀科低速离心机500g离心,30-35分钟,室温;
5. 离心后收集低带中性粒细胞,分两层,层为单核细胞,第二层为中性粒细胞;(若离心后分层不明显则多离心5-10分钟)
6. 将RP1640用纯水稀释为50%RP1640用于重悬中性粒细胞,恢复细胞活性。(5-10分钟)
7. 400g离心10分钟,去上清,收集中性粒细胞,重悬于RP1640中,细胞计数。
在细胞分离实验中,蜀科低速离心机肩负重任。蜀科低速离心机运行中可改变参数,操作简单、运行平衡、性能稳定、安全可靠,“TD-5Z台式低速多管架离心机”更曾入选“国产好仪器”。蜀科低速离心机广泛应用于,放射免疫、生物化学、食品卫生、环保等科研领域,选择选购!
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