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蜀科离心机分离植物细胞膜实验方法

发布时间:2016-03-30      点击次数:1056

  蜀科离心机广泛应用于农业科学、生物工程、食品、化工、制药、环保等科研和生产单位。今天给大家简单介绍一个用蜀科离心机分离植物细胞膜的实验供大家参考。我们选用的是蜀科的台式高速大容量冷冻离心机
*步,组织破碎,也可以用研磨的样本。如果存在大量粗纤维的话,你还可以用纱布过滤一下。裂解液配方,0.55M 蔗糖;0.76M Tris; 0.02M EDTA; 0.03M 抗坏血酸。用Hcl 调整HP 到7.8。原料/裂解液 1:2。
第二步,研磨液分3次用蜀科低速冷冻离心机分离出那些不需要的组织残渣或细胞器。 100G 10min ; 3000G 5min ; 17000G 15min。(速度不够的话适当延长时间,否则悬浮液中会存在大量的线粒体之类的细胞器)。
第三步,上一步得到的悬浮液是含有总膜的悬浮液,一般情况下, 下一步应该利用高速离心20000G以上的离心力,把所有的膜沉淀出来进一步纯化(这里好用蜀科高速离心机,推荐选用台式高速大容量冷冻离心机,离心力如果不够分离不出来,如果原料非常多的话可能会析出一些,你也可以试着改变下裂解液的蔗糖浓度,理论上密度变了以后沉降系数也会改变,不过这个要做大量的计算工作以确保不影响膜的纯度)。纯化有PEG/Dextran; 蔗糖梯度两种方法, 蔗糖梯度比较老了,效果不是很好,但是蔗糖很便宜很好弄。我们用的是6.3%PEG/Dextran 。

   因为实验中需要全程保持0-4度的温度,所以选用的是蜀科的冷冻离心机,了解更多实验室离心机操作方法,请收藏并继续关注我们的。

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